Qpcr市场调研报告
问:请问什么叫QPCR
- 答:(Polymerase Chain Reaction简称PCR)原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获1993年诺贝尔化学奖。因其在病原体检测方面的独特优势,因而在相关方法和仪器方面的研发非常快,成为分子生物学诊断的主流,至今仍处于学术和应用前沿,发展至今已有三代产品:第一代PCR定性检测技术及设备由基因扩增热循环仪(DNA Thermal Cycler)+电泳仪+紫外分析仪+定性试剂构成;第二代PCR-DNA终点定量技术及裤毕设备(End-point quantitative PCR detection)由基因扩增热循环仪弯纯卖+荧光仪+终点定量试剂构成,其又分为终点酶免定量(End-point ELISA-PCR)和终点荧光定量(End-point Flour-PCR)两种;第三代产品为QPCR-DNA/RNA实时荧光定量检测。 QPCR检测灵敏度高,检测线性范围宽,检测精度和重复性好等突出优势,因此被公认为当今世界用于临床的最先进分子诊断技术,被美国FDA承认并推崇。被美国FDA批准并取得临床应用执照的QPCR试剂品种有:HBV DNA,丙肝病毒HCV RNA,艾滋病病毒HIV RNA,沙眼衣原体CT,淋病双球菌NG,CMV,Mtb等。实时荧光PCR仪研发技术难度大,门槛高,发达国家也只有有限几家知名公司生埋逗产,且售价昂贵,在50-120万元。 可见,在病人看来,哪家医院应用了QPCR技术便是先进诊断技术的象征,在发达国家也是如此。参考资料:
问:高度保守的两个基因,如何做qPCR?
- 答:QPCR至少有以下特点:
所用仪器少,只用一台仪器。
检测时间短,只须45分闷丛纯钟~1小时10分钟(试剂各异),而定性PCR须3~4小时,酶免终点定量须6~8小时,荧光终点定量须2~3小时。
操作极其简单:前处理后,样本插入仪器一小时后到电脑上来出报告即可郑锋,无须开盖,移样本(以前方法),避免污染。
结果精确:定性PCR只能定性,很粗略,终点定量PCR由于只能在40个热循环结束后检测荧光,被测荧光达到饱和导致定量不够精确,属于半定蚂咐量状态。而实时荧光QPCR是在扩增的每时每刻连续检测各样本的荧光值的变化。
问:高通量qPCR芯片是否有生物学重复的要求?
- 答:一般来说高通量qPCR芯片要求有3个或3个以上的生物学重复,才能保证后续的分析结果能计算标准差和检验值等,便于后续唤培晌研究成果用中仿于和锋论文、报告和文章。
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