一、垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用（论文文献综述）
叶宏[1]（2019）在《预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究》文中研究说明[目 的]观察自主跑轮预适应、缺血后适应以及两者联合应用对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用有无差异,结合氧化应激指标、细胞凋亡因子的检测,探寻可能的潜在调控机制。[方 法]实验由三个部分组成:第一部分实验动物小鼠分为5组:1.假手术组。2.脑缺血再灌注损伤模型组。3.缺血后适应组。4.自主跑轮预适应组。5.自主跑轮预适应联合后适应组。在第一部分实验结果的基础上设定第二部分实验分组:小鼠分为3组:1.假手术组。2.缺血后适应组。3.自主跑轮预适应联合后适应组。为验证第一、二部分的实验推论,将第三部分实验动物分为4组:1.缺血后适应组。2.自主跑轮预适应联合后适应组。3.自主跑轮预适应+后适应-PI3K抑制剂组。4.自主跑轮预适应+后适应-STAT3抑制剂组。实验采用神经功能缺损评分表,检测小鼠神经功能障碍评分;水迷宫检测认知功能;TTC实验检测脑梗死灶体积;分子生物学系列实验检测氧化应激生化指标以及神经元凋亡情况;细胞免疫的改变,采用Western blot检测凋亡、信号通路相关因子的蛋白表达。[结 果]第一部分实验:与脑缺血再灌注组比较,自主跑轮预适应改善小鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积的作用不明显,后适应显着改善小鼠脑缺血再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积,自主跑轮预适应联合后适应进一步增强改善小鼠脑缺血/再灌注损伤后的神经功能、认知功能和减少脑梗死灶体积的作用,明显强于单独的预适应或后适应。与脑缺血再灌注组比较,预适应略有升高超氧化物歧化酶（SOD）活性和降低丙二醛（MDA）含量的作用,后适应能显着升高脑组织中SOD活性和降低MDA含量,自主跑轮预适应联合后适应,升高脑组织SOD活性,降低MDA含量的作用进一步增强,明显强于单独的自主跑轮预适应或后适应。与模型组比较,自主跑轮预适应减少缺血区脑组织的神经细胞凋亡数量不明显,后适应明显减少神经细胞凋亡数量,自主跑轮预适应联合后适应减少神经元细胞凋亡的作用进一步增强,明显强于单独的自主跑轮预适应或后适应。Western blot检测凋亡相关因子的蛋白表达,与脑缺血再灌注组比较,其中促凋亡因子Bax、Caspase-3的蛋白表达,预适应联合后适应的表达减弱,自主跑轮预适应或缺血后适应的表达无明显统计学意义;抗凋亡因子Bcl-2的蛋白表达,预适应联合后适应的表达增强,自主跑轮预适应或缺血后适应的表达无明显统计学意义。第二部分实验:Western blot检测信号通路相关因子的蛋白表达,其中PI3K、STAT3的蛋白表达,缺血后适应升高PI3K、STAT3活性。自主跑轮预适应和后适应联合干预提升PI3K、STAT3通路活性强于单独的后适应。第三部分实验:分别使用PI3K抑制剂LY294002、STAT3抑制剂SH454后,自主跑轮预适应联合后适应的脑保护作用明显减弱,表现为:神经功能评分降低,认知功能减退,脑梗死体积增大,TUNEL检测的凋亡细胞数量增多,促凋亡因子线粒体内细胞色素C、Bax、Caspase-3的蛋白表达增强,抗凋亡因子胞质内细胞色素C、Bcl-2的蛋白表达减弱。[结 论]1.后适应对小鼠脑缺血/再灌注损伤有保护作用,自主跑轮预适应联合后适应能进一步增强上述作用。2.自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用的增强可能依赖于激活抗氧化、抗凋亡的PI3K和STAT3信号通路。3.分别使用PI3K、STAT3抑制剂后,自主跑轮预适应联合后适应的脑保护作用明显减弱。
高令奇[2]（2016）在《胆碱能—谷氨酸能神经网络电活动转换在氯胺酮所致发育早期大鼠视网膜神经元凋亡中的作用研究》文中认为幼年动物长时间或反复接受全身麻醉可引起中枢神经系统神经元的广泛凋亡,尽管有研究提示全麻药的这一神经毒性作用可能与其抑制发育期,特别是突触形成高峰期神经网络的电活动有关,但具体机制尚不清楚。本研究应用电生理、免疫组织化学及TUNEL等检测技术探讨大鼠视网膜自发性节律性网络电活动在氯胺酮诱发发育早期神经元凋亡中的作用、机制及可能的治疗措施。结果发现,氯胺酮所致视网膜节细胞层神经元凋亡高峰期主要发生在P7-P9天,与胆碱能-谷氨酸能神经网络电活动转换期相吻合。氯胺酮不仅完全阻断自发性节律性网络电活动,而且明显抑制视网膜节细胞乙酰胆碱通道电流;激动乙酰胆碱受体或通过增加内源性乙酰胆碱的含量均可以减轻氯胺酮所致视网膜神经元凋亡,而阻断乙酰胆碱受体引起的凋亡与氯胺酮所致凋亡程度相似,提示氯胺酮引起的神经元凋亡之所以主要发生在突触形成高峰期,可能与氯胺酮阻断烟碱型乙酰胆碱受体并干扰胆碱能-谷氨酸能神经网络电活动的转换有关。另外,本研究还探讨了垂体腺苷酸环化酶激活肽-38（PACAP38）减轻氯胺酮所致神经元凋亡的可行性及其机制,结果发现PACAP38可以减轻氯胺酮所致视网膜节细胞层神经元凋亡,且其保护作用可以被腺苷酸环化酶（AC）抑制剂、蛋白激酶A（PKA）抑制剂以及细胞外调节蛋白激酶（ERK1/2）抑制剂拮抗。提示PACAP38主要通过cAMP/PKA信号通路及ERK1/2减轻氯胺酮所致视网膜节细胞层神经元凋亡。
丁文婷[3]（2014）在《补阳还五汤调节脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS的机制研究》文中研究表明目的：脑血管疾病（cerebrovascular disease）是一类严重影响人类身体健康的疾病,在全球,脑血管疾病是致死和致残的主要疾病之一,尤其是临床上较常见的缺血性脑血管病（ischemic cerebrovascular disease, ICVD）。ICVD的主要发病机制主要包括能量耗竭、酸中毒,氧自由基产生、损害,一氧化氮和一氧化氮合成酶,钙超载,炎症因子,细胞凋亡调控因子,兴奋性氨基酸（excitatory amino acid, EAA）。其中EAA是众多发病机制中最为关键的一个,它能引起其他机制的产生。谷氨酸（glutamate, Glu）是中枢神经系统中含量最高的兴奋性氨基酸,而胞外过多的Glu是会加重脑缺血损伤。据报告,补阳还五汤（Buyang Huanwu Decoction, BYHWD）能减少神经细胞外的谷氨酸浓度,而Glu的清除主要依赖于星形胶质细胞上谷氨酸转运体-1（glutamate transporter-1, GLT-1或GLT1）和谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase, GS）。所以,本实验主要运用免疫组织荧光化学和蛋白印迹western-blot等技术,探索补阳还五汤能否增加脑缺血后星形胶质细胞GLT1和GS蛋白的表达,从而减少细胞外谷氨酸的浓度；除此,本实验还对其作用机制进行初步探索,希望能为补阳还五汤治疗脑缺血提供更多的实验依据。方法：1.补阳还五汤对局灶性脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS表达的影响健康成年的SD大鼠,采用大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）法制备模型,手术结束大鼠清醒后,进行神经功能评分,评分合格的大鼠随机分为模型组（1d、3d、5d、7d）和药物组（1d、3d、5d、7d）,各组大鼠再缺血2h再灌24h后给药,其中模型组每次给予2ml的生理盐水灌胃,2次/d,药物组给予每次补阳还五汤（16g/kg）灌胃,2次/d。各组实验结束后,将动物进行全身灌注,取出大脑制备冰冻切片,采用免疫组织化学染色法和免疫组织荧光化学染色法分别检测各组GLT1和GS的表达,并用免疫荧光双标法对GLT1和胶质细胞原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein, GFAP）、GS和GFAP的表达进行检测,显微镜下观察并获取图片,用ImageJ进行图片分析。2.补阳还五汤影响局灶性脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS表达的机制研究健康成年的SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组（BYHWD）、补阳还五汤联合垂体腺苷酸环化酶激活多肽拮抗剂（pituitary adenylate cyclase activating polypeptide （6-38）, PACAP（6-38））组（BYHWD+PACAP（6-38））,每组18只。各组大鼠在缺血2h后尾静脉注射2次药物,分别为再灌前的15min和再灌后48h,其中假手术组、模型组和BYHWD组给予1ml生理盐水,BYHWD+PACAP（6-38）给予PACAP（6-38）（1.49mmol/ml）.此外,各组大鼠在缺血2h再灌24h后灌胃给药,假手术组和模型组每次给予2ml的生理盐水灌胃,2次/d, BYHWD组和BYHWD+PACAP（6-38）组给予补阳还五汤（16g/kg/次,2次/d）,各组连续给药3d。动物在最后一次灌胃给药后12h内取材,其中每组抽取3只制备冰冻切片,采用免疫组织荧光化学法检钡PACAP38. GLT1、GS和GFAP的表达；剩下的动物麻醉脱臼处死,取出大脑,冰上分离缺血侧大脑的海马组织,采用western-blot蛋白印迹法检钡GLT1、GS和GFAP的表达,紫外分光光度法检测谷氨酸浓度。结果：脑缺血后海马CA1区GLT1和GS的表达都是先升高后下降,药物组的两种蛋白表达均比同时间点的模型组高,且具有差异（P<0.01）；而给药3d后的GLT1和GS表达明显比其他给药组高（P<0.01）。脑缺血后,BYHWD组大鼠海马CA1区的PACAP表达明显比模型组高（P<0.01）,而BYHWD+PACAP（6-38）组大鼠缺血侧大脑海马GLT1和GS蛋白表达比BYHWD组的弱；并且BYHWD+PACAP（6-38）组的谷氨酸浓度与BYHWD组的相比有所升高；此外,GFAP在BYHWD+PACAP（6-38）组的表达比BYHWD组强。结论：补阳还五汤能通过PACAP介导星形胶质细胞GLTl和GS表达,减少缺血后谷氨酸浓度,从而保护神经元。
唐黎黎,史秀丽,李光武,傅佳[4]（2009）在《垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤脑保护作用的研究》文中指出目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的脑保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤（MCAO）模型,缺血前经侧脑室分别给予不同剂量的PACAP,脑缺血2 h/再灌注24 h,测定脑含水量、脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量。结果与NS组相比,PACAP各组脑含水量、MDA及NO含量均明显降低,SOD活性有不同程度的提高。结论PACAP对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤有明显的脑保护作用,中、高剂量组效果优于低剂量组,其机制可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关。
白宏英,路文革,王建平[5]（2008）在《垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响》文中研究指明目的观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（PACAP）对局灶性脑缺血-再灌注大鼠的脑保护作用及对核因子κBp65（NF-κBp65）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达的影响。方法取健康雄性SD大鼠72只,采用随机数字法分为假手术组、缺血-再灌注组、PACAP组,每组大鼠24只,每组再分为再灌注12h和24h组,每时间点12只大鼠。采用线栓法建立大脑中动脉缺血模型,于缺血后2h进行再灌注。PACAP组于再灌注30min内,由尾静脉注射（5×10-7）%的PACAP,（5×10-9）g/kg,假手术组和缺血-再灌注组,用等体积（0.1ml/kg）的等渗盐水代替PACAP。再灌注12、24h取脑,光镜下观察脑组织的结构;并采用Western印迹法检测NF-κBp65的表达,免疫组化法检测TNF-α的表达。结果①PACAP组大鼠光镜下脑组织细胞损伤程度与缺血-再灌注组相比明显减轻。②PACAP组再灌注12、24h,TNF-α阳性细胞的表达分别为（20.0±2.5）、（30.7±1.3）个/高倍视野,缺血-再灌注组分别为（40.8±3.7）、（60.7±3.5）个/高倍视野,与假手术组的（2.8±0.8）、（3.0±0.7）个/高倍视野的表达比较,差异均有统计学意义（P<0.01）,缺血-再灌注组与PACAP组比较,差异亦有统计学意义（P<0.01）。③再灌注12和24h,PACAP组NF-κBp65表达的灰度值为57±7、49±8,缺血-再灌注组为90±14、74±10,与假手术组的41±17、41±10比较,差异均有统计学意义（P<0.01）,缺血-再灌注组与PACAP组比较差异亦有统计学意义（P<0.01）。结论PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血-再灌注后TNF-α、NF-κBp65的表达,这可能是其脑保护作用机制之一。
初晨宇[6]（2008）在《FSH、GnRH在大鼠海马的表达及其对缺血再灌注损伤的保护性研究》文中进行了进一步梳理促性腺激素释放激素（GnRH）是由下丘脑神经元分泌的十肽小分子,促性腺激素释放激素受体（gonadotropin-releasing hormone receptor, GnRHR）属于七次跨膜的G蛋白耦联受体超家族。GnRH与GnRHR结合后,调节促性腺激素细胞分泌黄体生成素（luteining hormone ,LH）和卵泡刺激素（ follicle-stimulating hormone ,FSH）,在生殖过程中发挥重要作。促性腺激素包括FSH和LH,他们都是由α,β亚单位构成的二聚体糖蛋白。FSHR和LHR都是具有7个跨膜结构的G蛋白耦联受体。FSH和LH的分泌都受到下丘脑分泌的GnRH的调控。近年来的研究发现,GnRH及其受体还存在于下丘脑-垂体-性腺轴以外的脑组织、消化道、颌下腺、胰腺等消化器官以及前列腺癌等肿瘤细胞中,其功能也超出了生殖范畴。作为雌激素上游激素的GnRH及其受体在海马内也广泛存在,但未见有对其在缺血损伤下表达变化的报道。除垂体外,多种组织内均有FSH的存在。生殖系统中FSH可存在于前列腺,乳腺,睾丸,以及胎盘。在非生殖系统内可存在于胃的壁细胞,其功能也超出了生殖调控的范畴。FSHR除了在性腺中表达之外,也表达于输卵管上皮和子宫颈等部位。近年的研究发现,大鼠海马神经元中存在许多激素及其受体,其中包括作为生殖激素的GnRH、LH及它们的受体,但未见有存在FSH及其受体的报道。脑缺血再灌注损伤可以引发选择性的、延迟的神经元死亡,这种死亡主要是通过神经元的凋亡所引起的。近年来的研究已经表明,雌激素对海马CA1区缺血引起的神经元损伤和神经元凋亡具有保护作用,并且这种保护性作用是通过海马内的雌激素受体实现。GnRH及FSH是雌激素的上游激素,关于GnRH及FSH对海马神经元缺血再灌注损伤的保护性研究未见报道。由此我们进行了以下研究:应用原位杂交及免疫组织化学方法,结合图像分析系统,观察了缺血再灌注损伤后大鼠海马CA1区神经元GnRH及其受体的表达变化;应用原位杂交方法观察了FSH在大鼠海马的表达;应用免疫荧光组织化学双标记方法,在激光共聚焦显微镜下进行了大鼠海马FSH及其受体的共定位研究;应用免疫组织化学邻片双标记方法进行了大鼠海马FSH与GnRHR的共定位研究;通过制作大鼠MCAO模型、进行TUNEL染色的体内实验及制作大鼠海马神经元OGD模型、进行流式细胞仪Annexin V/PI双染色法检测的体外实验进行了FSH、GnRH对大鼠海马神经元缺血再灌注损伤的保护性研究。通过实验得到主要研究结果如下:大鼠海马CA1区神经元GnRH及GnRH mRNA的表达量随缺血再灌注损伤时间的延长而减少,阳性细胞数也随损伤时间延长而迅速减少。GnRHR及GnRHR mRNA的表达量随缺血再灌注损伤时间的延长先增加后减少,阳性细胞数随损伤时间延长而减少。损伤后3d, CA1区多型层及辐射层出现较多GnRH、GnRHR免疫反应及GnRH、GnRHR mRNA杂交信号弱阳性细胞;海马CA1至CA4区及齿状回的神经元呈FSH免疫反应阳性,同时也显示FSH mRNA阳性杂交信号,海马CA1至CA4区及齿状回的神经元呈FSHR免疫反应阳性,FSH和FSHR共定位于海马的同一神经元,FSH和GnRHR共定位于同一海马神经元;缺血再灌注损伤后72h,FSH干预组和GnRH干预组CA1区TUNEL染色阳性神经元平均灰度值大于对照组,即FSH干预组和GnRH干预组TUNEL染色阳性产物少于对照组。缺血再灌注损伤后72h,FSH干预组和GnRH干预组CA1区TUNEL染色阳性神经元数量比对照组少;FSH干预组、GnRH干预组与对照组相比,凋亡神经元百分比增加,存活神经元百分比减少。FSH干预组、GnRH干预组与无干预组相比,凋亡细胞百分比减少,存活细胞百分比增加。综上所述,本研究结果表明:缺血再灌注损伤后,大鼠海马CA1区神经元GnRH及GnRHR的表达发生变化,GnRH可能参与CA1区脑组织损伤后修复过程的调节;海马能表达FSH,海马的FSH神经元也是FSH作用的靶细胞。海马神经元产生的FSH可能通过旁分泌和自分泌途径对海马的功能进行调节,海马产生的GnRH也可能通过其受体对FSH神经元进行调节;预先给予一定浓度的FSH及GnRH干预,可以减少海马CA1区缺血再灌注损伤所引起的神经元凋亡。FSH及GnRH对神经元缺血再灌注损伤具有保护性作用。
段智慧[7]（2007）在《垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后P-ERK、P-JNK表达及凋亡的影响》文中指出背景和目的缺血性脑血管病（ischemic cerebrovascular diseases，ICVD）因其发病率、死亡率和致残率高而严重危害人类健康。神经损伤及细胞死亡机制一直是基础和临床医学研究的热点。近年来缺血再灌注损伤日益受到关注。脑缺血再灌注后神经元可发生凋亡。细胞凋亡是脑缺血半暗带区细胞死亡的主要方式。挽救该区尚存活的细胞是治疗缺血性脑血管病再灌注损伤的关键。垂体腺苷酸环化酶激活肽（Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide，PACAP）是一种多效肽，属于促胰液素／胰高血糖素／血管活性肠肽家族，具有极强激活腺苷酸环化酶活性。广泛分布于中枢和周围神经系统。有证据表明PACAP是一种有希望的神经保护肽。它在神经系统的发育和体内外损伤后的神经再生中有重要作用。研究表明外源性PACAP能通过缺血再灌注损伤的血脑屏障，缩小脑梗死体积，其作用机制尚不明了。丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）级联系统调节细胞压力和损伤反应，胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase，ERK）和c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）是这其中关键的物质。它们在胞浆中被磷酸化激活后移位至细胞核，激活转录因子并导致基因转录。ERK是主要的存活信号，而JNK则参与了细胞的凋亡。它们在脑缺血损伤后表达与动态平衡决定了脑损伤程度。但时空性表达规律尚未达成共识。本实验通过线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，并经大鼠尾静脉注射外源性的PACAP-38，观察大鼠神经功能和光镜下细胞坏死情况，通过免疫组化方法观察大鼠大脑皮层p-ERK、p-JNK阳性细胞表达，用末端脱氧核糖核酸介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺口末端标记（terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling，TUNEL）法检测凋亡阳性细胞表达，探讨局灶性脑缺血再灌注后神经元死亡的机制和PACAP-38的脑保护作用及机制。为临床应用PACAP治疗脑血管病提供实验和理论依据。材料和方法（1）健康雄性SD大鼠72只，体重280-320克，随机分成三组，假手术组（A）、缺血再灌注模型组（B）、PACAP组（C），每组24只，每组又根据缺血再灌注后不同时间点随机分为四小组，每小组6只。采用线栓法阻断大鼠左侧大脑中动脉血流2hr再灌注2、12、24、48hr制成局灶性脑缺血再灌注损伤模型（middle cerebral artery occlusion，MCAO）。假手术组除插线深度为10mm外，余同手术组。术后观察左侧Horner’s征和右侧肢体瘫痪症状以判断模型是否成功。PACAP组于再灌注30min内经尾静脉注射PACAP-38为1×10-9mol／kg（溶于1ml生理盐水），假手术组、缺血再灌注模型组大鼠在同一时间经尾静脉注射生理盐水1ml。（2）各小组于再灌注后各时间点进行神经功能学评分后，深麻醉大鼠，灌注、取脑、后固定、石蜡包埋、切片。采用H-E染色、免疫组化SP法和TUNEL法观察大鼠缺血脑皮层神经元变化、p-ERK、p-JNK阳性表达和神经元凋亡。p-ERK和p-JNK一抗浓度均为1∶300。（3）应用SPSS11.0统计软件进行数据处理。实验数据用均数±标准差（（?）±s）表示。两样本均数间的比较采用独立样本t检验；多样本比较采用完全随机资料的方差分析法（单因素方差分析法，one-way ANVON）处理。以a=0.05作为显着性检验水准。结果（1）模型制成后，缺血再灌注模型组和PACAP组大鼠均出现不同程度的精神萎靡、右侧肢体肌力减弱。PACAP治疗组与缺血再灌注模型组比较明显降低了2、12、24、48hr时间点的神经功能学评分，差别有统计学意义（P＜0.05）。（2）各组病理切片苏木素-伊红（HE）染色观察：假手术组无梗死灶，神经元形态结构正常。缺血再灌注模型组大鼠脑皮层可见明显梗死灶，缺血中心区损伤神经元不同程度肿胀、变性、坏死，少见正常神经元，有大量炎性细胞浸润，梗死灶周围出现固缩浓染细胞。PACAP组梗死灶小，受损神经元数目和炎性细胞数目较缺血再灌注模型组少，周围固缩浓染的细胞数明显减少。（3）假手术组皮层偶见极少数的TUNEL染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层半影区可见较多凋亡细胞。PACAP组与缺血再灌注模型组比较明显降低了12、48hr再灌注后缺血皮层的凋亡细胞数，差别有统计学意义（P＜0.05）。（4）假手术组皮层偶见极少数的p-ERK染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层阳性细胞主要表达在缺血半暗带，主要定位于神经元核内。2hr阳性细胞最多（P＜0.05）。PACAP组与缺血再灌注模型组比较增加了2、12、24、48hr时间点的阳性细胞数，差别有统计学意义（P＜0.05）。（5）假手术组皮层偶见极少数的p-JNK染色阳性细胞。缺血再灌注模型组和PACAP组缺血侧皮层阳性细胞2hr表达在缺血半暗带和中心区，余时间点则主要表达在半暗带。主要定位于神经元核内。有两个高峰分别为再灌注后2hr和48hr（P＜0.05）。PACAP组与缺血再灌注模型组比较降低了2、12、24、48hr时间点的阳性细胞数，差别有统计学意义（P＜0.05），但仍高于假手术组。结论（1）p-ERK、p-JNK在大鼠脑缺血再灌注后的表达可能具有动态和时空依赖性的变化规律。p-ERK早期表达在缺血半暗带。p-JNK表达有早、晚两个高峰，表达于缺血的中心区和半暗带。（2）PACAP-38可能抑制了缺血半暗带的神经元凋亡。可能是通过平衡c-Jun氨基端激酶（JNK）和细胞外信号调节激酶（ERK）的磷酸化，升高了p-ERK的表达，降低了p-JNK的表达而实现的。（3）经大鼠尾静脉注入的外源性PACAP-38能明显减轻大脑皮层缺血再灌注损伤，对神经细胞有较明确的保护作用。
路文革[8]（2007）在《垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后炎性因子表达的影响》文中指出背景和目的免疫炎症反应在脑缺血再灌注损伤中起重要作用。随着脑缺血损伤炎症机制研究的深入，炎性细胞因子的作用越来越受到关注。局部炎性因子、趋化因子及粘附分子的表达上调，构成了缺血性损伤向炎性损伤转变的基础，随后白细胞向缺血区的聚集和浸润导致了继发性神经元损伤和梗塞面积的扩大。核因子KB（NF-KB）是参与炎症反应的一个重要转录因子，是脑缺血病灶炎症反应过程中的关键环节。肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种重要的炎性细胞因子。在脑缺血再灌注的炎症反应中起级联放大作用。黏附分子在炎症发生、发展过程中起着重要作用。细胞间黏附分子（ICAM-1）是重要的黏附分子，介导血循环中的白细胞和脑微血管内皮细胞黏附、积聚、浸润于缺血区脑组织，促进了缺血后炎症的形成，产生缺血-炎症-缺血的恶性循环。垂体腺苷酸环化酶激活肽-38（pituitary adenylate cyclase-activatingpolypeptide，PACAP）是一种新的下丘脑促垂体激素，广泛分布于中枢神经系统，在正常情况下就能完整地透过血脑屏障，通过作用于PACAP受体而起作用，其神经营养、保护作用越来越受到人们的关注。Reglodi等动物实验发现，外源性的PACAP能缩小局灶性和全脑缺血后梗死面积，减轻缺血再灌注后神经元损伤。但其脑保护作用的分子机制尚不完全清楚。本实验采用线栓法制备大鼠缺血再灌注模型，观察PACAP对缺血再灌注损伤后NF-κB、TNF-α、ICAM-1表达的影响，目前国内外尚无这方面动物试验的报导，以探讨PACAP的脑保护机制，为PACAP治疗缺血性脑血管病提供实验依据。材料与方法1模型建立用Koizumi线栓法，建立大鼠局灶性脑缺血模型。将栓线从颈外动脉至颈内动脉，插入左侧大脑中动脉（MCA），遇阻即止，线栓前端颈内动脉起始处约18.5±1.0mm，阻断该侧MCA的血流供应。假手术组线栓深度为10mm。线栓插入后出现左侧Horner征，Longa评分为1～3分认为模型制作成功。模型成功的大鼠在缺血2h后拔线至颈外动脉残端内进行12h、24h再灌注。2实验动物分组及给药方法健康SD大鼠72只，体重300±20 g，随机分为假手术组、缺血再灌注组和PACAP组，PACAP组于再灌注30分钟内，由尾静脉注射，1×10-9mol／kg。假手术组和脑缺血再灌注组，用等体积生理盐水代替PACAP。按分组规定的再灌注时间断头取脑，36只标本迅速放入液氮保存，用作Western印迹检测；其余标本准备制作石蜡切片。3指标观测（1）神经功能缺损评分：参考Longa 5分制评分标准，分别于缺血2h再灌注12h、24h进行神经功能评分。（2）HE染色：光学显微镜下观察脑组织病理变化。（3）免疫组织化学染色：活化的NF-κB阳性染色为胞核棕色颗粒、TNF-α和ICAM-1阳性细胞胞浆被染成棕黄色。在显微镜下放大400倍，随机选择不重叠的6个视野，统计阳性细胞数。ICAM-1切片在显微镜下放大400倍，随机选择不重叠的6个视野，统计阳性血管数，测得的数据用（?）±s表示。Western-blot：检测NF-κB的表达，并通过凝胶成像系统定量扫描灰度值。4统计方法实验数据用均数±标准差（（?）±s）表示。应用SPSS11.5统计软件进行数据分析，符合正态分布、方差齐的两组均数间比较采用t检验，神经功能缺损评分采用q检验，以α=0.05作为检验水准。结果1神经功能缺损评分：假手术组神经功能缺损评分为0分，缺血再灌注组12h、24h评分分别为2.00±0.06、2.36±0.78，与假手术组数值比较，有显着性差异（P＜0.05）。PACAP组大鼠缺血再灌注后12h、24h组评分分别为1.08±0.56、1.09±0.62，与缺血再灌注组相比，有显着性差异（P＜0.01）。2脑组织病理变化：假手术组大鼠大脑外观正常，无肿胀，表面血管清晰可见；缺血再灌注组大鼠缺血侧大脑半球与对侧相比肿胀明显，MCA供血区苍白，无光泽，表面血管消失。脑组织切片显示：假手术组脑组织结构无明显异常；缺血再灌注组可见大量变性及坏死的神经细胞，少量胶质细胞，灶周有胶质细胞、炎性细胞；且随再灌注时间的延长而加重；PACAP组皮层缺血中心范围较小，病变较缺血再灌注组明显减轻。3 NF-κB的表达：假手术组NF-ΚB细胞核内微量表达；缺血再灌注组的缺血侧大脑半球在再灌注后12、24hNF-ΚB细胞核内表达增高。PACAP组脑缺血再灌注后NF-ΚB细胞核内表达明显减少。Western印迹检测NF-ΚB表达结果：再灌注后12h、24h脑缺血再灌注组分别为98.06±13.70，74.46±10.30，与假手术组数值比较，有显着性差异（P＜0.01）；PACAP组分别为56.62±6.86，48.56±8.12，与缺血再灌注组比较，有显着性差异（P＜0.01）。4 TNF-α的表达：假手术组阳性细胞数分别为2.83±0.75、2.96±0.68。缺血再灌注组再灌注12h和24h分别为40.82±3.71、60.67±3.49，与假手术组比较，有显着性差异（P＜0.01）。PACAP组分别为20.70±1.33、30.00±2.48，与缺血再灌注组比较，有显着性差异（P＜0.01）。5 ICAM-1的表达：假手术组ICAM-1阳性血管数分别为0.56±0.16、0.64±0.02。缺血再灌注组再灌注12h和24h分别为6.00±0.66、12.02±1.51，与假手术组比较有显着性差异（P＜0.01）；PACAP组分别为1.68±0.42、4.02±0.50，与缺血再灌注组比较，各时间点的表达量均显着减少，有显着性差异（P＜0.01）。结论1．本实验采用大脑中动脉线栓法成功制备局造性缺血再灌注模型，接近人类缺血性脑血管病的发生过程，能准确控制脑缺血及再灌注时间，创伤小、重复性好、再灌注成功率高、梗死灶恒定。2．应用PACAP后可以降低大鼠缺血再灌注损伤后的神经功能缺损评分，减轻脑组织病理改变。3．应用PACAP可以减少缺血再灌注损伤后NF-ΚB、TNF-α、ICAM-1的表达。4．本实验为PACAP治疗脑缺血再灌注损伤提供了实验依据，PACAP有望成为一种新的脑保护剂，在缺血性脑血管病的治疗中发挥作用。
施昱丞[9]（2007）在《针刺对实验性高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的实验研究》文中研究指明研究目的:近年来脑血管病的发病率呈现较快的上升趋势,该类疾病的致残率和病死率较高。动脉粥样硬化是脑血管病的基本病因之一,而血脂代谢紊乱可致动脉粥样硬化,这在国内外许多研究报道中已证实;血脂异常与脑血管疾病密切相关。高脂血症是引起和加重动脉粥样硬化的病理基础,是导致脑血管疾病的重要危害因素;高脂血症约占整个脑卒中发病率的1/3,因此,降低血脂对减少脑血管疾病的发病率具有重要的意义。在临床上脑血管病患者大多有高脂血症,而高脂血症患者在脑卒中后,会因原本的血脂代谢紊乱,更加重脑缺血后损伤,比单纯性脑缺血损伤更严重;有效地调节血脂水平就可预防脑血管疾病的发生。因此寻找适当有效的早期干预防治措施是针灸临床与实验研究的重要课题之一。研究方法:（1）首先以高脂饲料喂养大鼠造成高脂血症大鼠后,采用氯化铁（FeCl3）化学诱导大脑中动脉血栓闭塞模型法,将高脂血症大鼠造成高血脂合并脑缺血模型,将动物随机分为八组,电针术前干预及脑缺血后全程治疗;（2）应用生化法观察高血脂大鼠脑缺血后血脂四项变化及针刺的影响;（3）应用神经行为学指标观察治疗前后神经症状的改善情况;应用形态学方法观察缺血侧及海马区大脑病理改变状况及针刺的作用;（4）采用免疫组化方法观察针刺前后大鼠缺血侧及海马区星形胶质细胞表达GFAP、HSP70、S-100β、vimentin等的变化;（5）通过双抗夹心ABC-ELISA法,测定脑匀浆中神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的含量。结果:1.经典高脂配方饲料喂养所致的高血脂模型较为理想,然后采用氯化铁（FeCl3）化学诱导大脑中动脉血栓闭塞模型法,将高脂血症大鼠造成高血脂合并脑缺血模型。以大鼠血脂四项的变化,可以作为大鼠高血脂模型检测的方法之一。2.大鼠在造成脑缺血损伤后,1-2h的神经行为症状均有阳性反应,各脑缺血模型组神经行为症状评分显着高于正常对照组和高血脂模型组,脑缺血模型各组行为症状评分总体高于各针刺组,针刺各组有减少评分趋势。提示针刺可以降低大鼠神经行为症状评分,改善神经功能缺损体征。3.针刺可以通过降低总胆固醇、低密度脂蛋白,升高高密度脂蛋白的含量,有效地调节血脂水平。4.在单纯高血脂大鼠海马区、缺血区,与正常对照组比较,高血脂模型组的GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度减少,经针刺治疗7d后,与高血脂模型组比较,高血脂治疗组的GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度增加。而在脑缺血损伤发生后,在大鼠海马区、缺血区GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度显着增加;经针刺治疗7d后,与脑缺血模型组比较,脑缺血治疗组的GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度增加。在高脂血症大鼠造成高血脂合并脑缺血模型后,与脑缺血模型组比较,高血脂合并脑缺血模型组在大鼠海马区、缺血区GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度降低。而与高血脂合并脑缺血模型组比较,高血脂合并脑缺血治疗Ⅰ组、Ⅱ组GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的阳性细胞个数、面密度、光密度升高均有极显着差异, p<0.01;与高血脂合并脑缺血治疗Ⅱ组比较,高血脂合并脑缺血Ⅰ组GFAP、HSP70、S-100β及vimentin等的各项升高均有极显着差异,p<0.01;5.NGF、BDNF及bFGF的含量:脑缺血治疗组>脑缺血模型组>正常对照组;正常对照组>高血脂治疗组>高血脂模型组。与正常对照组比较,高血脂模型组及高血脂合并脑缺血模型组的NGF、BDNF及bFGF含量均极显着低于正常对照组（P<0.01）;与高血脂合并脑缺血模型组比较,高血脂合并脑缺血治疗Ⅰ组及高血脂合并脑缺血治疗Ⅱ组的NGF及bFGF含量均极显着高于高血脂合并脑缺血模型组（P<0.01） ;高血脂合并脑缺血治疗Ⅰ组的BDNF含量极显着高于高血脂合并脑缺血模型组（P<0.01）,高血脂合并脑缺血治疗Ⅱ组的BDNF含量高于高血脂合并脑缺血模型组,但二者无差异（P>0.05）;高血脂合并脑缺血治疗Ⅰ组及高血脂合并脑缺血治疗Ⅱ组的NGF及BDNF含量均极显着高于高血脂合并脑缺血模型组（P<0.01） ;高血脂合并脑缺血治疗Ⅰ组的bFGF含量高于高血脂合并脑缺血治疗Ⅱ组。结论:1.本实验首先选用经典高脂饲料喂养大鼠6周造成高血脂模型后,接着再用FeCl3化学诱导大脑中动脉血栓闭塞模型法造成局灶性脑缺血,最终二种模型结合造成高血脂合并脑缺血模型。高血脂合并脑缺血模型建立成功,将可为往后的针刺对高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的各种实验研究及探究高血脂合并脑缺血的发病机理提供正确的动物模型。2.脑缺血损伤过程中,高脂血症可加重脑缺血损伤程度;3.针刺可以通过降低总胆固醇、低密度脂蛋白,升高高密度脂蛋白的含量,有效地调节血脂水平。4.持续电针治疗可使星形胶质细胞表达GFAP、HSP70、S-100β、vimentin及大脑中神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的含量,在相当长时间内保持较高水平,有利于受损神经元的修复;电针介入治疗时间点有其重要性,电针早期介入治疗可能是治疗高血脂合并脑缺血疾病的良策,而电针持续增高星形胶质细胞表达GFAP、HSP70、S-100β、vimentin及持续增高大脑中神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的含量,可能是电针抗高血脂合并脑缺血损伤的重要机制之一。
唐黎黎[10]（2007）在《垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑保护作用的研究》文中认为目的:观察垂体腺苷酸环化酶激活肽（pituitary adenylate cyclase activating polypep-tide, PACAP）对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑保护作用,并对其可能的机理进行探讨,为临床治疗缺血性脑血管病（ischemic cerebrovascular disease, ICVD）提供实验依据。方法:本项研究采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,设立假手术组、生理盐水（normal saline, NS）组和PACAP低、中、高剂量组（分别用PACAP1、2、3组表示）。假手术组接受造模手术,但不插线,不给药;NS组和PACAP1、2、3组于造模前15分钟,借助大鼠脑立体定向仪及微量注射器由侧脑室分别给予NS 5ml、PACAP 10-11 mol、PACAP 10-10 mol和PACAP 10-9 mol,再行造模手术,缺血2h再灌注24h,测定脑梗死体积反映脑损伤程度;测定脑含水量反映脑水肿程度;测定脑组织中自由基（free radical, FR）清除剂超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性和脂质过氧化降解产物丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量,二者反映氧自由基生成的变化;测定脑组织中一氧化氮（nitrogen monoxidum, NO）含量,反映NO生成的变化;脑组织HE染色（hematoxylin and eosin stain, HE）及损伤区域存活神经元计数,反映缺血再灌注区域神经元损伤程度。实验结果:1脑缺血2h再灌注24h,NS组损伤侧脑组织有明显的梗死现象。PACAP各剂量组脑梗死体积明显缩小,与NS组相比具有统计学差异。PACAP2组、3组与PACAP1组相比,脑梗死体积缩小,其差异具有统计学意义。PACAP2组、3组脑梗死体积相比差异不具有统计学意义。2脑缺血2h再灌注24h,NS组损伤侧脑组织含水量明显增加。PACAP各剂量组脑含水量明显低于NS组,与其相比差异具有统计学意义。PACAP2组、3组与PACAP1组相比,脑含水量明显减少,其差异具有统计学意义。PACAP2组、3组脑含水量相比无显着统计学差异。3脑缺血2h再灌注24h,NS组脑组织SOD活性明显下降。PACAP各剂量组能不同程度的提高SOD活性,与NS组相比差异具有统计学意义。PACAP2组与PACAP1组相比,脑组织SOD活性明显升高,其差异具有统计学意义。PACAP1组、3组之间,PACAP2组、3组之间脑组织SOD活性差异无统计学意义。4脑缺血2h再灌注24h,NS组脑组织MDA含量明显增加。PACAP1组脑组织MDA含量与NS组相比无显着统计学差异。PACAP2组、3组能不同程度的降低脑组织MDA含量,与NS组相比具有显着统计学差异,PACAP2组、3组与PACAP1组相比,MDA含量明显较少,其差异具有统计学意义。PACAP2组、3组之间脑组织MDA含量差异无统计学意义。5脑缺血2h再灌注24h,NS组脑组织NO含量明显增加。PACAP1组脑组织NO含量与NS组相比无显着统计学差异。PACAP2组、3组能不同程度的降低脑组织NO含量,与NS组相比其差异具有统计学意义。PACAP2组、PACAP3组与PACAP1组相比,NO含量明显降低,其差异具有统计学意义。PACAP2组、3组之间脑组织NO含量差异不具有统计学意义。6脑缺血2h再灌注5天后NS组脑组织呈缺血性改变,可见星形胶质细胞水肿,稀释变性,锥体细胞体积缩小,细胞核固缩深染,胞浆嗜伊红,小胶质细胞明显增生,形成格子细胞,炎细胞浸润,部分细胞坏死、消失,并可见呈筛状的坏死灶,存活神经元数目稀少。PACAP1组镜下脑组织缺血性改变无显着改善,其存活神经元数目与NS组相比无显着统计学差异。PACAP2组、3组可见不同程度细胞水肿减轻,核固缩减少,存活神经元数目较多,与NS相比具有统计学差异。PACAP2组、3组与PACAP1组相比,存活神经元数目明显增多,其差异具有统计学意义。PACAP2组、3组存活神经元数目相比,其差异无明显统计学意义。实验结论:PACAP可以缩小大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后的脑梗死体积,减轻脑组织水肿,升高脑组织SOD活性,减少MDA含量,使NO生成减少,使损伤区域存活神经元数目增多,对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有明显的脑保护作用,其机理可能与减轻脑水肿、清除自由基、抗脂质过氧化有关。
二、垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用（论文提纲范文）
（1）预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一部分 自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 自主跑轮预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 PI3K、STAT3信号通路介导了自主跑轮预适应联合后适应对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 |
| 1. 实验动物及分组 |
| 2. 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述一 脑部缺血预适应的诱发因素、机制及应用前景 |
| 参考文献 |
| 综述二 运动与学习和记忆能力关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（2）胆碱能—谷氨酸能神经网络电活动转换在氯胺酮所致发育早期大鼠视网膜神经元凋亡中的作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 绪论 |
| 第一部分 胆碱能-谷氨酸能神经网络电活动转换在氯胺酮所致神经元凋亡中作用 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 主要试剂的配制 |
| 2.4 电极拉制拉制 |
| 2.5 实验动物及分组 |
| 2.6 实验方法 |
| 2.7 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 氯胺酮对新生大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡的影响 |
| 3.2 氯胺酮对新生大鼠视网膜节细胞层细胞自发性节律性电活动的影响 |
| 3.3 nAChR在新生大鼠视网膜节细胞层细胞自发性节律性电活动中的作用.. |
| 3.4 氯胺酮对新生大鼠视网膜节细胞层细胞乙酰胆碱通道电流的影响 |
| 3.5 nAChR在氯胺酮所致发育早期视网膜节细胞层神经元凋亡中的作用 |
| 3.6 nAChR亚型在P7 天大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡中的作用 |
| 3.7 内源性乙酰胆碱对氯胺酮所致P7天大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡的影响 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 第二部分 PACAP38 对氯胺酮所致发育期视网膜神经元细胞凋亡的影响及机制研究 |
| 1.引言 |
| 2.材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 主要仪器设备 |
| 2.3 主要试剂的配制 |
| 2.4 电极拉制 |
| 2.5 实验动物及分组 |
| 2.6 实验方法 |
| 2.7 统计分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 PACAP38 对氯胺酮所致P7 天大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡的影响 |
| 3.2 PACAP38对P7 天大鼠视网节细胞层细胞自发性节律性电活动的影响 |
| 3.3 cAMP/PKA通路在PACAP38 减轻氯胺酮所致P7 天大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡中的作用 |
| 3.4 ERK1/2在PACAP38 减轻氯胺酮所致P7 天大鼠视网膜节细胞层神经元凋亡中的作用 |
| 4.讨论 |
| 5.小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文及参研项目 |
（3）补阳还五汤调节脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS的机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 研究背景 |
| 1.1 缺血性脑血管病的研究进展 |
| 1.1.1 缺血性脑血管病的病因 |
| 1.1.2 缺血性脑血管病的病理 |
| 1.1.3 缺血性脑血管病的发病机制 |
| 1.2 局部脑缺血星形胶质细胞中GLT和GS的研究进展 |
| 1.3 补阳还五汤对脑缺血的研究进展 |
| 1.3.1 形态学研究 |
| 1.3.2 细胞水平研究 |
| 1.3.3 生化分子水平 |
| 1.3.4 钙离子调节 |
| 1.3.5 兴奋性氨基酸的调节 |
| 第二章 实验研究 |
| 2.1 补阳还五汤对局部脑缺血大鼠脑内GLT1和GS的影响 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验器材 |
| 2.1.3 实验方法 |
| 2.1.4 实验结果 |
| 2.1.5 讨论 |
| 2.2 补阳还五汤调节局部脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS机制的初步探索 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.2.4 实验结果 |
| 2.2.5 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（4）垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤脑保护作用的研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与试剂 |
| 1.2 动物模型与分组 |
| 1.3 脑组织含水量测定[4] |
| 1.4 脑组织SOD活性测定 |
| 1.5 脑组织MDA含量测定 |
| 1.6 脑组织NO含量测定 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 PACAP对脑缺血/再灌注大鼠脑组织含水量的影响 |
| 2.2 PACAP对脑缺血/再灌注大鼠脑组织SOD活性的影响 |
| 2.3 PACAP对脑缺血/再灌注大鼠脑组织MDA含量的影响 |
| 2.4 PACAP对脑缺血/再灌注大鼠脑组织NO生成的影响 |
| 3 讨论 |
（5）垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 局灶性脑缺血-再灌注损伤模型的制作 |
| 1.3 脑组织石蜡切片的制备及HE染色 |
| 1.4 TNF-α的检测 |
| 1.5 Western印迹检测 NF-κB |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 光镜下组织形态学的观察结果 |
| 2.2 PACAP对TNF-α表达的影响 |
| 2.3 PACAP对NF-κB p65表达的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 脑缺血-再灌注与NF-κB p65和TNF-α的表达 |
| 3.2 PACAP对脑缺血-再灌注后NF-κB p65和TNF-α表达的影响 |
（6）FSH、GnRH在大鼠海马的表达及其对缺血再灌注损伤的保护性研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言和文献回顾 |
| 一、经典的促性腺激素释放激素-促性腺激素-性激素轴 |
| 二、卵泡刺激素及其受体的研究进展 |
| 三、脑内GnRH 及其受体的研究进展 |
| 四、对缺血再灌注损伤及其保护性的研究进展 |
| 五、海马及其功能 |
| 六、对雌激素保护性作用的研究 |
| 七、大鼠局灶性脑缺血模型建立的研究进展 |
| 实验研究 |
| 一、缺血再灌注损伤对大鼠海马CA1 区神经元GnRH 及其受体表达的影响 |
| 1、材料和方法 |
| 2、结果 |
| 3、讨论 |
| 二、大鼠海马FSH 的原位杂交及其与FSHR 和GnRHR 的共定位研究 |
| 1、材料和方法 |
| 2、结果 |
| 3、讨论 |
| 三、GnRH 及FSH 对大鼠海马神经元缺血再灌注损伤的保护性研究 |
| 1、体内保护性研究 |
| 2、体外保护性研究 |
| 3、讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（7）垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后P-ERK、P-JNK表达及凋亡的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 正文部分 |
| 垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后P-ERK、P-JNK表达及凋亡的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述部分 |
| 丝裂原活化蛋白激酶与脑缺血损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 缩略语表 |
| 硕士期间发表的文章 |
| 致谢 |
（8）垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后炎性因子表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 正文部分 垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后炎性因子表达的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 综述部分 垂体腺苷酸环化酶激活肽的脑保护作用 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 缩略词 |
| 致谢 |
（9）针刺对实验性高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 针灸治疗高脂血症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 针刺对实验性脑缺血损伤作用机理研究 |
| 参考文献 |
| 综述三 星形胶质细胞在脑缺血损伤后作用机理的研究 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 高血脂合并脑缺血大鼠模型的建立 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠治疗前后血脂含量变化的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠神经行为症状及病理改变的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验四 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞表达GFAP 的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验五 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞表达HSP70 的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验六 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞表达S-100β的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验七 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞表达vimentin 的影响 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 实验八 针刺干预后高血脂合并脑缺血大鼠NGF、BDNF、bFGF 含量的变化.. |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综合讨论 |
| 1. 高血脂合并脑缺血大鼠模型的建立 |
| 2. 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠治疗前后血脂的影响及机理研究 |
| 3. 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠神经行为症状及病理改变的影响 |
| 4. 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠海马、缺血区星形胶质细胞表达 GFAP、HSP70、S-100β 及 vimentin 等的影响研究 |
| 5. 针刺对高血脂合并脑缺血大鼠 NGF、BDNF 及 bFGF 等表达的影响研究 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（10）垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑保护作用的研究（论文提纲范文）
| 一、英文缩略词表 |
| 二、中文摘要（关键词） |
| 三、英文摘要（关键词） |
| 四、正文 |
| 1 引言 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 PACAP 对脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响 |
| 4.2 PACAP 对脑缺血再灌注大鼠脑含水量的影响 |
| 4.3 PACAP 对脑缺血再灌注大鼠脑组织 SOD 的影响 |
| 4.4 PACAP 对脑缺血再灌注大鼠脑组织 MDA 的影响 |
| 4.5 PACAP 对脑缺血再灌注大鼠脑组织 NO 的影响 |
| 4.6 PACAP对脑缺血再灌注大鼠脑组织病理学的影响 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 五、参考文献 |
| 六、附录 |
| 七、致谢 |
| 八、综述及参考文献 |
四、垂体腺苷环化酶激活肽对缺血再灌注脑神经元凋亡的作用（论文参考文献）
- [1]预适应联合后适应增强小鼠脑缺血再灌注损伤保护机制的研究[D]. 叶宏. 昆明医科大学, 2019(05)
- [2]胆碱能—谷氨酸能神经网络电活动转换在氯胺酮所致发育早期大鼠视网膜神经元凋亡中的作用研究[D]. 高令奇. 上海交通大学, 2016(03)
- [3]补阳还五汤调节脑缺血星形胶质细胞GLT1和GS的机制研究[D]. 丁文婷. 广州中医药大学, 2014(01)
- [4]垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤脑保护作用的研究[J]. 唐黎黎,史秀丽,李光武,傅佳. 中国药理学通报, 2009(04)
- [5]垂体腺苷酸环化酶激活肽对脑缺血-再灌注大鼠核因子κB和肿瘤坏死因子α表达的影响[J]. 白宏英,路文革,王建平. 中国脑血管病杂志, 2008(08)
- [6]FSH、GnRH在大鼠海马的表达及其对缺血再灌注损伤的保护性研究[D]. 初晨宇. 第四军医大学, 2008(01)
- [7]垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后P-ERK、P-JNK表达及凋亡的影响[D]. 段智慧. 郑州大学, 2007(04)
- [8]垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后炎性因子表达的影响[D]. 路文革. 郑州大学, 2007(04)
- [9]针刺对实验性高血脂合并脑缺血大鼠星形胶质细胞影响的实验研究[D]. 施昱丞. 北京中医药大学, 2007(02)
- [10]垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤脑保护作用的研究[D]. 唐黎黎. 安徽医科大学, 2007(03)